北方偉業(yè)計量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0g，蛋白胨：10.0g，NaCl：10.0g，pH：7.0(25℃) |
| 傳代方法 | ①溶解：向質(zhì)粒干粉中加入20μL無菌水進(jìn)行溶解，室溫靜置1min； ②混合：取50μl 感受態(tài)細(xì)胞與10μl 質(zhì)粒 DNA 混勻，冰上放置 30min； ③熱激導(dǎo)入：42℃靜置 90s； ④收縮膜孔：冰浴 2min； ⑤修復(fù)培養(yǎng)：毎管加 800μl 液體培養(yǎng)基，37 ℃搖床培養(yǎng)1h（150 r/min）； ⑥篩選培養(yǎng)：將適當(dāng)體積（100 μl）的復(fù)蘇細(xì)胞，涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（瓊脂面務(wù)必干燥后）， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現(xiàn)菌落； ⑦提?。禾羧慰寺【渲料鄳?yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h，根據(jù)試驗需要提取質(zhì)粒 |
| 生長條件 | 37℃；18-24h；好氧 |
| 存儲條件 | 2-8℃ |
| 安全等級 | 1 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | pUC18、pUC19載體適合于DNA片段的克隆、進(jìn)行DNA測序、對外源基因進(jìn)行表達(dá)等。由于在lacZ領(lǐng)域中含有多克隆位點，因此在以lacZ缺欠細(xì)胞作為宿主 (如：JM109等) 進(jìn)行轉(zhuǎn)化后，在含有IPTG、X-Gal 的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)時，可以很容易地通過藍(lán)白篩選，判斷載體中有無DNA片段的插入。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 |
pVAX1
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pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
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(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
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(Lemo21(DE3)Chemically Competent Cell)
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